Estandarización del proceso de aislamiento de vesículas extracelulares en células de cáncer de mama triple negativo

Rodríguez, Juan Felipe

doi:https://doi.org/10.48713/10336_36824

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Estandarización del proceso de aislamiento de vesículas extracelulares en células de cáncer de mama triple negativo

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dc.contributor	Villegas, Victoria
dc.contributor.advisor	Martínez Agüero, Magdalena María
dc.contributor.advisor	Rincón Riveros, Andrés
dc.contributor.gruplac	Grupo de Investigación Moléculas Biológicas y Actividad Celular	es
dc.creator	Rodríguez, Juan Felipe
dc.creator.degree	Biólogo	es
dc.creator.degreeLevel	Pregrado
dc.creator.degreetype	Full time	es
dc.date.accessioned	2022-11-01T17:01:28Z
dc.date.available	2022-11-01T17:01:28Z
dc.date.created	2022-08-09
dc.description	Las vesículas extracelulares (EV) son estructuras delimitadas por una membrana lipídica que son secretadas por casi todos los tipos de células al espacio extracelular. Están involucradas en diferentes procesos de comunicación celular; particularmente, se ha identificado que las EV derivadas de células cancerosas desempeñan un papel importante en la modificación del microambiente tumoral ya que tienen la capacidad de transportar diferentes tipos de biomoléculas como proteínas y tipos de RNA, que actúan como reguladores en el ciclo celular. Estas características permiten el uso de EV como biomarcadores para el diagnóstico y seguimiento de diferentes patologías, entre ellas el cáncer de seno, así como su uso en terapias dirigidas. El objetivo de este estudio consistió en estandarizar una metodología para el aislamiento de EV presentes en el medio sobrenadante de cultivo de dos líneas celulares de cáncer de mama, así como su caracterización mediante el uso de técnicas basadas en anticuerpos. Los resultados muestran que las vesículas producidas por las células, tanto en cáncer luminal A como en triple negativo, tienen micro RNA (miRNA), por lo que se constituyen efectivamente en una herramienta para diagnóstico y seguimiento de la enfermedad. Finalmente, este estudio permitió el aislamiento de EV a partir de cultivo celular comprobando la eficiencia de las columnas SEC qEV2 de IZON en laboratorios ubicados sobre los 2000 m.s.n.m y eliminando la contaminación por EV provenientes del suero fetal bovino (SFB) sin afectar significativamente la viabilidad del cultivo celular usando medio de cultivo sin suplementar	es
dc.description.abstract	Extracellular vesicles (EVs) are lipid membrane-bound structures that are secreted by almost all cell types into the extracellular space. They are involved in different cell communication processes; particularly, it has been identified that EVs derived from cancer cells play an important role in modifying the tumor microenvironment since they have the capacity to transport different types of biomolecules, such as proteins and types of RNA, which act as regulators in the cell cycle. These characteristics allow the use of EVs as biomarkers for the diagnosis and monitoring of different 4 pathologies, including breast cancer, as well as their use in targeted therapies. The principal aim of this study was to standardize a methodology for the isolation of EVs present in the culture supernatant of two breast cancer cell lines, as well as their characterization using antibody-based techniques. The results show that the vesicles produced by the cells, both in luminal A cancer and in triple negative cancer, have micro-RNA (miRNA), for which they effectively constitute a tool for diagnosis and monitoring of the disease. Finally, this study allowed the isolation of EVs from cell culture, proving the efficiency of IZON qEV2 SEC columns in laboratories located above 2000 m.a.s.l. and eliminating EV contamination from fetal bovine serum (FBS) without significant effect on the cell culture viability using unsupplemented culture medium	es
dc.description.sponsorship	Fondo para el Financiamiento de Proyectos de Grado de la Facultad de Ciencias Naturales - Universidad del Rosario	es
dc.format.extent	18 pp	es
dc.format.mimetype	application/pdf	es
dc.identifier.doi	https://doi.org/10.48713/10336_36824
dc.identifier.uri	https://repository.urosario.edu.co/handle/10336/36824
dc.language.iso	spa	es
dc.publisher	Universidad del Rosario
dc.publisher.department	Facultad de Ciencias Naturales
dc.publisher.program	Biología
dc.rights.accesRights	info:eu-repo/semantics/openAccess	es
dc.rights.acceso	Abierto (Texto Completo)	es
dc.rights.licencia	EL AUTOR, manifiesta que la obra objeto de la presente autorización es original y la realizó sin violar o usurpar derechos de autor de terceros, por lo tanto la obra es de exclusiva autoría y tiene la titularidad sobre la misma.	spa
dc.source.instname	instname:Universidad del Rosario
dc.source.reponame	reponame:Repositorio Institucional EdocUR
dc.subject	Vesículas extracelulares	es
dc.subject	Cáncer de mama	es
dc.subject	Biomarcadores	es
dc.subject	Micro RNA	es
dc.subject.ddc	Enfermedades	es
dc.subject.keyword	Extracellular vesicles	es
dc.subject.keyword	Breast cancer	es
dc.subject.keyword	Biomarkers	es
dc.subject.keyword	MicroRNA	es
dc.title	Estandarización del proceso de aislamiento de vesículas extracelulares en células de cáncer de mama triple negativo	es
dc.title.TranslatedTitle	Standardization of the extracellular vesicle isolation process in triple-negative breast cancer cells	es
dc.type	bachelorThesis	es
dc.type.document	Trabajo de grado	es
dc.type.hasVersion	info:eu-repo/semantics/acceptedVersion
dc.type.spa	Trabajo de grado	es
local.department.report	Escuela de Ciencias e Ingeniería	es